Molecular diagnosis of Phytophthora lateralis in trees, water, and foliage baits using multiplex plymerase chain reaction

2001

S. 275-283

15 Lit. Ang.

Unselbständiges Werk

200091002

eine auf der PCR beruhende Methode zum Nachweis von Phytophthora lateralis in Pflanzengeweben und Wasser wird beschrieben. Deletionen in den beiden ITS Regionen der ribosomalen DNA von P. lateralis wurden zur Synthese von PCR-Primern ausgenutzt, die ein 738 Basenpaare langes Fragment nur dan amplifizieren, wenn P. lateralis in der Probe vorhanden ist. Universelle Primer, die konservierten Sequenzen der kleinen Unterheit der ribosomalen Kern-DNA entsprechen, wurden als interne Kontrolle in die Multiplex-PCR miteinbezogen. Diese Primer amplifizieren ein ungefähr 550 Basenpaare langes Fragment, das sowohl bei Pflanzen als auch bei Protisten und höheren Pilzen vorkommt. Mit der Methode liess sich P. lateralis im Stamm und in den Wurzeln von Lawsons Scheinzypresse verlässlich nachweisen. Für den Nachweis von P. lateralis im Wasser waren mindestens 200 Zoosporen nötig.