Differenzierung von drei Bursaphelenchus-Arten durch RAPD-PCR

1995

S. 310-314

21 Lit. Ang.

Unselbständiges Werk

200052163

Ziel der Untersuchungen war die Anwendung der RAPD-PCR-Methode (Random Amplified Polymorphic DNA-Polymerase Chain Reaction) zur taxonomischen Unterscheidung des Kiefernholznematoden, Bursaphelenchus xylophilus, von verwandten Arten. Die zu diesem Zweck verwendeten 14 Isolate von Bursaphelenchus xylophilus, 12 Isolate von Bursaphelenchus mucronatus, 7 Isolate von Bursaphelenchus fraudulentus und 2 Bursaphelenchus-Isolate unbekannter Zugehoerigkeit stammten aus Asien, Europa und Nordamerika und wurden an Botrytis cinerea auf Malzagar vermehrt. Sie wurden mit 13 unterschiedlichen 10basigen Zufallsprimern der Operon-Kits B, E, Y und Z getestet. Hierbei wurden informative Bandenmuster der amplifizierten DNA- Fragmente erhalten, die inter- und intraspezifische Unterschiede widerspiegelten. Eine zuverlaessige Differenzierung und Identifizierung von Bursaphelenchus xylophilus und Bursaphelenchus mucronatus war mit Primer OPY- 01 moeglich, waehrend mit Primer OPB-07 Bursaphelenchus xylophilus gegenueber Bursaphelenchus fraudulentus abgegrenzt werden konnte. Zur Unterscheidung von Bursaphelenchus mucronatus und Bursaphelenchus fraudulentus war Primer OPZ-08 am besten geeignet. Unsere Ergebnisse bestaetigten die taxonomische Zuordnung des kanadischen C2-Isolates zur Art Bursaphelenchus mucronatus durch Harmey und Harmey (1993). Die Unterschiede in den RAPD-Bandenmustern zwischen den Isolaten von Bursaphelenchus mucronatus aus Japan und China einerseits und aus Europa, Sibirien und Kanada andererseits stuetzen die These von Beckenbach et al. (1992) hinsichtlich eines separaten taxonomischen Status der letztgenannten Herkuenfte. Die Bandenmuster der beiden undefinierten Isolate aus den USA entsprechen denen der europaeischen Art Bursaphelenchus fraudulentus. Weitere Untersuchungen zur besseren intraspezifischen Unterscheidung innerhalb der Arten Bursaphelenchus xylophilus und Bursaphelenchus mucronatus sind vorgesehen.